Мастер-микс SupRealQ Ultra Hunter SYBR qPCR (U+)
Q713-00 100 rxns
Q713-02 500 rxns
Q713-03 2,500 rxns
Q713-04 500 rxns
Описание продукта
Этот продукт представляет собой специализированную премикс для реакций ПЦР в режиме реального времени с использованием флуоресцентного метода SYBR Green I, окрашенного в фиолетовый цвет для облегчения загрузки образца. Основной фермент – Taq-полимераза, отобранная с помощью платформы BioSmart, с высокой специфичностью и распознаванием несовпадений на 3′-конце. В сочетании с двухвидовыми антителами с высокой степенью закрытия он образует Taq-фермент с горячим стартом, который поддерживает строгое закрытие при температуре 55°C. В сочетании с оптимально подобранным буфером для ПЦР в режиме реального времени он обеспечивает точное обнаружение и эффективную амплификацию целевых генов даже при небольшом количестве матрицы или генах с низкой экспрессией. Реагент включает в себя систему предотвращения загрязнения dUTP/UDG, работающую при комнатной температуре, что предотвращает аэрозольное загрязнение и гарантирует точность результатов ПЦР в режиме реального времени. Кроме того, этот продукт содержит специальный пассивный референсный краситель ROX, что делает его совместимым с широким спектром приборов для ПЦР в режиме реального времени. Нет необходимости корректировать концентрацию ROX для разных инструментов — просто добавьте праймеры и шаблоны во время настройки реакции, чтобы начать амплификацию.
Функции
- Низкая экспрессия, высокая точность: разработанный для малочисленных целей, он фиксирует сигналы с малым количеством шаблонов, низкой концентрацией и низким входным сигналом с превосходной стабильностью, превосходя аналогичные продукты.
- Простая работа со сложными шаблонами: легко обрабатывает деградированные образцы и шаблоны с высоким ГХ, обеспечивая надежные результаты даже в сложных экспериментальных сценариях.
- Интеллектуальная система защиты от загрязнений, эксперименты без проблем: оснащенный системой dUTP/термолабильного UDG, он эффективно устраняет загрязнения при комнатной температуре, обеспечивая более чистые и надежные эксперименты.
- Технология предварительного смешивания, непревзойденная стабильность: полностью предварительно смешанная формула, сохраняющая постоянные характеристики даже после смешивания с праймерами и шаблонами и хранения в течение 72 часов , предлагающая непревзойденную гибкость и стабильность.
Компоненты
Хранилище
Хранить при температуре от -30 до -15°C в защищенном от света месте. Транспортировать при температуре ≤0°C.
Производительность
Совместимость со сложными образцами
Благодаря платформе BioSmart наш основной фермент проходит скрининг на высокую эффективность амплификации и сочетается с запатентованной технологией блокировки двухвидовых антител. Эта комбинация обеспечивает стабильную амплификацию сложных матриц, снижая необходимость в повторных настройках системы и повышая эффективность экспериментов исследователей.
А. Надежное обнаружение относительно малочисленных генов
Используя мастер-микс SupRealQ Ultra Hunter SYBR qPCR Master Mix (U+) (Vazyme #Q713), реакции количественной ПЦР были проведены на кДНК 293T для различных генов в идентичных условиях. Некоторые гены демонстрировали более высокие значения C T по сравнению с другими (как показано для гена 1, гена 2 и гена 3 на графике ниже), что указывает на их относимость к генам с относительно низкой представленностью.
Для гена 3 амплификация проводилась с использованием Vazyme #Q713 и реагента для количественной ПЦР на основе красителя конкурента (поставщик A). Результаты показали, что Vazyme #Q713 превзошёл реагент поставщика A по чувствительности к малораспространённым генам , сохранив при этом высокую специфичность к продуктам амплификации.
Б. Амплификация умеренно деградированных образцов.
РНК, выделенная из ткани поджелудочной железы Litopenaeus vannamei, была подвергнута гель-электрофорезу, который не выявил четких полос, что указывает на деградацию образца. Деградированная РНК была обратно транскрибирована в кДНК, которая затем была разбавлена в 2 раза в трех градиентах. Амплификацию гена креветки проводили с использованием Vazyme #Q713 и реагента для количественной ПЦР на основе красителя от Поставщика А на системе ABI QuantStudio 3.
Результаты показали, что Vazyme #Q713 обеспечивает стабильную амплификацию деградированных образцов , при этом эффективность амплификации соответствует стандарту MIQE (минимальная информация для публикации количественных экспериментов ПЦР в реальном времени) 90–110%.
В. Амплификация генов с высоким и низким содержанием GC
Используя в качестве матрицы геномную ДНК 293T, Vazyme #Q713 и реагент для количественной ПЦР на основе красителя Поставщика А, были использованы для амплификации гена 4 и гена 5, представляющих высокое и низкое содержание GC соответственно, в системе ABI QuantStudio 3.
Результаты показали, что Vazyme #Q713 продемонстрировал превосходную чувствительность и специфичность по сравнению с Поставщиком А как для генов с высоким, так и для генов с низким содержанием ГЦ.
Широкий линейный диапазон
кДНК печени мыши подвергалась 10-кратному серийному разведению, и проводилась qPCR-амплификация генов мыши с использованием Vazyme #Q713 и реагента для qPCR на основе красителя Поставщика А в системе ABI QuantStudio 3.
Результаты показали, что Vazyme #Q713 продемонстрировал эффективность амплификации в диапазоне 90–110 %, который считается надежным согласно рекомендациям MIQE в широком линейном диапазоне, превзойдя Поставщика А.
Эффективная защита от загрязнений
Vazyme #Q713 включает в себя систему защиты от загрязнений dUTP/термолабильный UDG, которая эффективно удаляет загрязнения из реакционной смеси при комнатной температуре. При повышении температуры реакции до 50–55 °C термолабильный UDG быстро инактивируется, сохраняя целостность кДНК и гарантируя сохранение чувствительности обнаружения.
Для проверки эффективности удаления загрязнений в реакционную смесь было добавлено 60 мкг и 600 мкг U-содержащих шаблонов. Результаты показали, что Vazyme #Q713 обеспечивает эффективность удаления загрязнений более 99,99% , что фактически гарантирует точность экспериментальных результатов.
