Мастер-микс для qPCR miRNA Unimodal SYBR
https://www.vazymeglobal.com/product-center/mirna-quantification/mirna-unimodal-sybr-qpcr-master-mix
MQ102-00 100 rxns
MQ102-01 125 rxns
MQ102-02 500 rxns
Описание продукта
Этот продукт представляет собой специализированный премикс, разработанный для количественного определения miRNA с использованием флуоресцентного метода SYBR Green I. Премикс окрашен в синий цвет для удобного и точного пипетирования. В связи с короткой длиной последовательностей miRNA и высоким сходством, часто встречающимся внутри семейств miRNA, достижение высокой специфичности критически важно для точного количественного определения. Основной фермент этого продукта был селективно разработан с помощью платформы BioSmart. Он отличается исключительной специфичностью, точным распознаванием 3′-концевых несовпадений и способностью удлинять максимально короткие последовательности оснований. В сочетании с высокогерметичными двухвидовыми антителами фермент образует Taq-полимеразу с горячим стартом, которая обеспечивает строгое подавление активности при 55°C. В сочетании с оптимизированным буфером, специально разработанным для количественной ПЦР, этот продукт обеспечивает высокую чувствительность и специфичность количественного определения miRNA. Этот премикс также включает специально разработанный пассивный референсный краситель ROX, совместимый с широким спектром приборов для количественной ПЦР. Дополнительная корректировка концентрации ROX на разных платформах не требуется. Просто добавьте праймеры и матрицы в реакционную систему, чтобы начать амплификацию. Кроме того, этот продукт предоставляет универсальные внутренние референсные праймеры U6 для образцов человека, крысы и мыши, что позволяет получать превосходные стандартные кривые в широком динамическом диапазоне.
Для достижения оптимальной производительности мы рекомендуем использовать эту предварительную смесь с набором для синтеза первой цепи ДНК miRNA (от stem-loop) ( Vazyme #MR101 ) или набором для синтеза первой цепи ДНК miRNA (от tailing A) ( Vazyme #MR201 ).
Компоненты
Функции
- Эффективный рабочий процесс: включает в себя референтные восходящие и нисходящие праймеры U6, а также универсальные нисходящие праймеры типа «стебель-петля» и специализированное программное обеспечение для проектирования.
- Высокая чувствительность: обнаруживает целевые микроРНК на уровне всего нескольких пикограмм от общей РНК.
- Исключительная специфичность: позволяет дифференцировать несовпадения одного основания с неспецифической частотой распознавания ниже 5%.
Хранилище
Хранить при температуре от -30 до -15°C в защищенном от света месте. Транспортировать при температуре ≤ 0°C. После размораживания Master Mix можно хранить в течение 6 месяцев при температуре от 2 до 8°C в защищенном от света месте.
Производительность
Эффективный рабочий процесс
Набор Vazyme #MQ102 оснащен программным обеспечением для проектирования праймеров типа «стебель-петля» для miRNA и универсальными праймерами для последующего расщепления. Кроме того, он включает референтные праймеры U6 (прямой и обратный), совместимые с образцами человека, крысы и мыши. Эти особенности обеспечивают точность стандартных кривых в широком диапазоне количественного определения.
Высокая чувствительность
Используя РНК, выделенную из клеток 293T и разбавленную в шести градиентах (от 1 пг до 100 нг), в качестве матриц, обратную транскрипцию проводили с помощью набора для синтеза первой цепи кДНК miRNA (методом stem-loop) (Vazyme #MR101). Полученную кДНК использовали для количественного определения экспрессии hsa-miR-21-5p с помощью Vazyme #MQ102. Результаты показали, что Vazyme #MQ102 надежно обнаруживает целевые микроРНК на уровне пикограммов от общей РНК и позволяет получать точные стандартные кривые в широком диапазоне количественного определения.
Исключительная специфичность
МикроРНК представляют собой короткие последовательности, и члены одного семейства часто имеют очень схожие последовательности, иногда отличающиеся всего одним нуклеотидом. Это делает специфичность критически важной для точного количественного определения микроРНК. Vazyme #MQ102 использует основной фермент, содержащий два антитела, и оптимизированную буферную систему, что позволяет точно различать различия в пределах одного нуклеотида. Уровень неспецифического распознавания составляет менее 5%, что обеспечивает высокоспецифичное количественное определение.
