Набор для одношагового клонирования ClonExpress Ultra V2
C116-00 5 rxns
C116-01 20 rxns
C116-02 40 rxns
Описание продукта
Технология ClonExpress — это простая, быстрая и высокоэффективная технология бесшовного клонирования ДНК. Она позволяет быстро осуществлять направленное клонирование вставок в любой сайт любого вектора. Используйте любой метод для линеаризации вектора и введите концевую последовательность линеаризованного вектора на 5′-конец прямого/обратного праймера амплификации вставки так, чтобы 5′- и 3′-концы ПЦР-продукта имели ту же последовательность концов (15–20 п.н.), что и линеаризованный вектор соответственно. ПЦР-продукт с той же последовательностью, что и конец вектора, и линеаризованный вектор смешиваются в определённой пропорции. Под действием рекомбиназы трансформация может быть проведена при температуре 50°C в течение 5–30 минут для завершения направленного клонирования.
Набор для одношагового клонирования ClonExpress Ultra V2 — это новое поколение наборов для рекомбинантного клонирования, совместимых с гомологичной рекомбинацией от 1 до 5 фрагментов. Высокооптимизированная смесь 2 × CE значительно повышает эффективность рекомбинации нескольких фрагментов. Этот продукт обладает более широкой совместимостью с содержанием GC в гомологичных плечах, что гарантирует успешность клонирования в сложных условиях.
Функции
- Просто: готовая к использованию суперсмесь в одном тюбике
- Быстро: рекомбинация занимает всего 5–30 минут.
- Эффективно: эффективно клонирует фрагменты размером 50 п.н. — 10 к.б., положительный результат > 95%
- Совместимость: подходит для гомологичных последовательностей, богатых GC/AT
- Специальная оптимизация: максимальная совместимость с перекрытиями размером 15–35 п.н., а не только 15–20 п.н.
Экспериментальные случаи
Простой и быстрый рабочий процесс : для разработки праймеров рекомендуется использовать онлайн-программу Vazyme для дизайна праймеров – CE Design. Набор использует свойства запатентованной рекомбиназы «Exnase» для сборки фрагментов ДНК с общей гомологией терминальных концов, не оставляя лишних последовательностей или рубцов (бесшовное клонирование). Трансформируйте собранный продукт непосредственно в компетентные клетки, и на планшете будут сформированы сотни отдельных клонов для положительного скрининга.
Высокопродуктивные одиночные клоны: в тесте 19 реакционных систем количество одиночных клонов Vazyme #C116 было выше, чем у того же типа продуктов (Поставщик A, Поставщик B и Поставщик C); в тесте 9 реакционных систем количество одиночных клонов Vazyme #C116 было выше, чем у того же типа продуктов (Поставщик D).
Высокий процент положительных результатов: в тесте 30 реакционных систем положительный результат Vazyme #C116 составил более 90%.
Широкая совместимость: были протестированы система с содержанием гомологических плеч 86,7%/6,7%, система с длиной гомологических плеч 35 п.н. и система с неочищенными фрагментами. Как показано на рисунке ниже, частота положительных результатов для всех этих систем превышает 90%.
Компоненты
Хранилище
Хранить при температуре от -30 до -15°C и транспортировать при температуре ≤0°C.